高效液相色谱仪与气相色谱仪的比较
高效液相色谱仪是在经典液柱色谱仪的基础上,引入气相色谱仪理论,采用高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性、应用范围广。高效液相色谱仪与气相色谱仪的对比如下:
一、适用范围:
1、气相色谱仪:
(1) 可汽化的样品,热稳定性好,沸点低。
(2)沸点高,挥发性差,热稳定性差,无法检测离子和聚合物样品。
(3) 气相色谱仪只能分析15%~20%的有机物。
2、高效液相色谱仪:
(1)溶解后可制成溶液的样品。
(2)分子量大,不易汽化,热稳定性差,可检出高分子和离子样品及生理活性物质。
(3)用途广泛,占有机物的80%-85%。
2.流动相:
1、气相色谱仪:
(1) 流动相是气体。
(2)流动相无毒,易于操作。
(3)流动相与组分之间没有亲和力,它只与固定物相互作用,不参与分布和平衡过程。
2、高效液相色谱仪:
(1)流动相为液体。
(2) 大多数流动相都是有毒的。
(3)容易污染环境。
(4)成本较高。
(5)流动相与组分之间存在亲和性,提高了色谱柱的选择性,提高了分离度,对分离起到了很大的作用。
(6)流动相种类多,选择余地大。
(7)流动相极性和PH值的选择对分离有重要作用。
(8) 两种或多种不同比例的液体可用作流动相,以提高分离选择性。
三、固定相:
1、气相色谱仪:种类很多。
2、高效液相色谱仪:没有气相色谱仪那么多的固定相。
4、色谱柱:
1、气相色谱仪:毛细管柱可以获得非常高的柱效。
2、高效液相色谱仪:柱子不能很长,柱效也不是很高。
5. 选择性:
1.气相色谱仪:流动相不影响分布。通常,通过改变色谱柱的固定相和温度来改变选择性。
2、高效液相色谱仪:主要靠改变流动相来改变选择性。
6.探测器:
1、气相色谱仪:有非常灵敏的选择性检测器,也有更灵敏的通用检测器。
2、高效液相色谱仪:更灵敏的通用检测器。
七。工作温度:
1,气相色谱仪:加热。
2、高效液相色谱仪:室温。
8、运行操作困难:
1. 气相色谱仪:简单。
2、高效液相色谱仪:比气相色谱仪稍微难一点。
9、仪器制造难点:
1.气相色谱:难度较低。
2、高效液相色谱仪:难度较大。
10. 样品回收:
1、气相色谱仪:破坏样品,难以回收。
2、高效液相色谱仪:不损伤样品,回收容易且可定量,适合大规模制备。
11. 其他:
1、高效液相色谱仪可完成较难的分离。
气相色谱仪的流动相载气是色谱惰性的,不参与分布和平衡过程。组分与流动相之间没有亲和力,仅与固定相相互作用。流动相与高效液相色谱的组分之间存在亲和性,提高了色谱柱的选择性,提高了分离度,对分离起到了很大的作用。两种或多种不同比例的液体可用作流动相以提高分离选择性。通常在室温下操作有利于色谱分离条件的选择。
2、凡能用气相色谱仪分析的样品,一般不用高效液相色谱仪。
气相色谱仪更快、更灵敏、更方便、更便宜。
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