固相萃取仪基本原理及操作流程简略表明

        固相萃取就是这种制样设备。它应用液固相色谱的基本理论，选择选择性吸收和增白方法对样品进行包合、分离、清洗，使样品更加纯净，从而减少残留物的干扰在检验产品上进行检验，进一步提高检验的准确性。
        固相萃取的原理是采用选择性吸收和选择性增白的液相色谱分离的基本原理。比较常见的方法是将待测化学物质按催化剂载体储存在液体试样的水溶液中，然后用中等抗压强度的有机溶剂洗去残留物，再用少量有机溶剂使待测化学物质快速变白，进而超越清洗和萃取目的快速分离。固相萃取也可以类似于这种简单的色谱分析来分离整个过程。
         1. SPE 小柱或膜的选择
        SPE 小柱或膜的尺寸和规格应由样品中分析物的浓度值决定。对于浓度值较低的人体样品，通常应使用较少的固定相填料来纯化大体积样品。
         2. 活动
        纯化前，加入填充小柱的溶剂清洗小柱或用5-10ml溶剂清洗滤膜，保持SPE填料湿润。包装材料的干燥会降低样品的保留值。小柱子的不同干燥程度也会损害利用率的再现性。先加入乙醇等水溶性溶剂清洗填料。由于乙醇可以润湿催化剂载体的表面并渗透到非光学活性硅橡胶的键合中，所以硅橡胶更容易被水润湿；然后加水或缓冲液清洗。创造与测试样品溶剂相容的自然环境，提高利用率。
         3. 加载样本
        通常可以使用以下方法：
         (1)用0.1mol/L酸或碱调至pH9，抽滤上层提纯；
         (2)用乙醇、乙腈沉淀蛋白质后，取上清，用水或缓冲液稀释纯化；
         (3)用酸或无机盐沉淀蛋白质，取上清，调节pH值，纯化；
         (4)超声15分钟后加水和缓冲液，取上清进行纯化。水流速应控制在1ml/min，过快的水流速不利于被测物与静止的紧密结合。
         4. 漂洗
        反相 SPE 的清洗溶剂多为水或缓冲液。可在清洗液中加入少量溶剂、无机盐或调节pH值。加入小柱的清洗液不要超过一根小柱的容量，SPE过滤膜为5-10ml。
         5. 粉饰
        应使用5～10ml离子强度差但能冲洗被测物的洗白溶剂。如果你想要更高的灵敏度，你应该先蒸发洗白液，然后用液相重组剩余的资产和样品。身体样本在洗涤后含有水分，因此可以使用冷冻干燥。储存能力较差的SPE填料可用小体积、较差的洗白液洗涤分析物，然后使用高旋光性的HPLC分析柱如C18柱对洗白的物质进行分析。如果分析物可以被电离，则可以通过调节pH值来抑制受试品的电离，以提高分析物在反相SPE填充材料中的储存。在增白过程中，调节pH值使其电离，使用不良溶剂进行增白，收集洗白液后，调节pH值以提高HPLC分析中的实际分离效果。在整个刷白过程中，要减慢水流速度，用2次小流量刷白代替1次大流量刷白，利用率更高。